jueves, 24 de febrero de 2011

PCR ( Reacción en Cadena de la Polimerasa ).

PCR: sirve para amplificar un fragtmento de ADN. TIPOS: PCR anidada ( el producto de una amplificación es usado como molde para realizar una segunda amplificación con cebadores ubicados dentro de la primera secuencia amplificada ); PCR in situ ( consiste en una reacción de PCR en secciones histológicas o células, donde los productos generados pueden verse en el sitio de amplificación ); PCR multiplex ( se amplifica más de una secuencia en una misma reacción, y emplea dos o más pares de cebadores en un único tubo con el fin de amplificar simultáneamente múltiples segmentos de ADN ); RT-PCR ( el molde inicial  es ARN y se necesita de una transcriptasa inversa para realizar la conversión del ARN a ADNc ( ADN complementario ); PCR tiempo real  ( permite cuantificar la cantidad  de ADN o ARN presentes en la muestra original, o para identificar con una muy alta probabilidad muestras de ADN específicas a partir de su Tf ). USOS de la PCR: análisis de ADN fósil, huella genética, identificación de especies, test de paternidad, diagnóstico de enfermedades hereditarias, genotipo de mutaciones específicas, clonación de génes, mutagénesis,... El CICLO DE AMPLIFICACION : calentamiento a 94-95 grados centígrados, desnaturalización, unión del cebador, extensión de la cadena, elongación final, conservación y optimización de la PCR. TERMOCICLADOR: el aparato donde está automatizado todo el proceso de la PCR.

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